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《疯狂约会美丽都》(Les Triplettes de Belleville),法语动画电影,由法国动画导演西拉维·休曼(Sylvain Chomet)执导,由法国、比利时、英国与加拿大共同合作。《佳丽村三姊妹》于2003年坎城影展首映,并曾经入围奥斯卡最佳动画片奖。
导演Sylvain Chomet承认《佳丽村三姊妹》受到情景喜剧的影响,也参考了法国导演贾克·大地(Jacques Tati)的作品《Jour de fête》与《Monsieur Hulot's Holiday》。他将这些元素与默剧融合进这部电影的音效当中。
《佳丽村三姊妹》的音乐是受到1920年代当时的启发,也受到约瑟芬·贝克、弗雷德·阿斯泰尔与强戈·海因哈特的影响。
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Cas9需要2条RNA分子来做DNA的剪切,然而,Cpf1只需要1条。Cas9蛋白在切割DNA双链时,两条链上的切口在两链的相同位置上,所以留下的末端是平末端(非粘性末端)。Cpf1蛋白则不同,其在DNA两条链上的切割位点不在同一位置上,因此会产生粘性末端。由于粘性末端的缘故,在Cpf1酶切末端上插入新序列比Cas9的酶切末端上更容易。
Cpf1只需要1个RNA序列来导引,并且不需要tracrRNA(tracrRNA在别的CRISPR/Cas系统中起到了促进引导RNA形成的作用)。Cpf1蛋白还使用了富含T碱基的PAM序列。
Cpf1是在细菌的基因组数据库中搜索出来的,而且Cpf1基因在很多物种的基因组中都出现了 最终用于基因编辑的Cpf1蛋白是从16种含有Cpf1的细菌中的2种(Acidaminococcus和Lachnospiraceae )中提取出来的。
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