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碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，简称ALP或ALKP） (3.1.3.1)是一类水解酶，可在核苷酸、蛋白质、生物碱等分子上去除磷酸基，进行去磷酸化作用，在碱性环境下最为有效，故得名碱性磷酸酶。
在革兰氏阴性菌中，碱性磷酸酶位于细胞膜以外的周质空间。因为周质空间相比细胞内部受环境变化的影响更大，故细菌碱性磷酸酶更不易失活、变性和降解，能保持较高活性。至于碱性磷酸酶为何分布于此目前还未完全清楚，一个简单的说法是碱性磷酸酶在此切割出游离的磷酸以供吸收。支持这一观点的证据是碱性磷酸酶通常在细菌面临磷酸不足时合成。然而，也有其他的可能性存在，比如磷酸基团的存在通常会阻碍生物大分子透过细胞膜，而去磷酸化作用可能有助于细菌对环境中物质的吸收。
大肠杆菌碱性磷酸酶的最适pH为8.0，而家牛的最适pH偏高一点，达8.5。
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