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更新于 2026-10-19

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多重退火循环扩增法 (Multiple Annealing and Looping Based Amplification Cycles,缩写MALBAC) 是一种准线性的全基因组扩增方法。与非线性或指数的传统DNA扩增方法不同(在每个循环中,复制的DNA可以作为后续循环的模板),MALBAC利用特殊引物使扩增子具有互补末端以形成环状,防止DNA被指数复制。这导致仅扩增原始基因组DNA,因此减少了扩增偏差。 MALBAC“用于鸟枪法生成有重叠、涵盖大部分基因组的扩增子”。为了进行下一代测序,MALBAC完成后再进行常规PCR进一步扩增。

在进行MALBAC之前,需要通过各种方法分离单个细胞,包括激光捕获显微切割、微流体装置、流式细胞术或微量移液,然后裂解。MALBAC单细胞全基因组扩增需要进行5个循环地淬灭、延伸、解链和成环。

MALBAC的主要优点是DNA几乎呈线性扩增。使用专门的引物可以使扩增子形成环,从而防止它们在MALBAC的后续循环中进一步扩增。这些引物有35个核苷酸长,有8个可变核苷酸与模板互补结合,还有27个共有核苷酸。共有的核苷酸序列为:GTG AGT GAT GGT TGA GGT AGT GTG GAG。8个可变核苷酸与单链基因组DNA分子随机退火结合。一次延伸后,产生仅在5'末端包含共有核苷酸序列的“半扩增子”。半扩增子后面用作另一轮延伸的模板,然后产生全扩增子,即3'端与5'端序列互补的扩增子。

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相关阅读:多重退火循环扩增法

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2006年、2009年、2010年国际小姐世界大会数度登陆中国。

2009年,国际小姐主办地再次降临中国,选在了具有“选秀之都”美称的四川成都的国际网球中心举行。本次比赛云集了来自世界各个国家和地区的66名佳丽,最终来自墨西哥的阿娜加布列娜-埃斯皮诺萨艳压群芳,夺得2009年国际小姐评选冠军,亚军和季军分别由韩国小姐和英国小姐获得,来自中国的王芊则捧走了“最佳友情奖”。

2010年11月7日晚,第50届国际小姐世界大会全球总决赛在成都拉开帷幕。来自全球70个国家和地区的70名佳丽经过激烈角逐,最终委内瑞拉小姐Elizabeth Mosquera摘得桂冠,泰国小姐Piyaporn Deejing、中国小姐袁思怡分获亚军和季军,现场还决出多个单项奖。

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瓦拖河,也称草堵河,位于中国云南省中部,是沙甸河左岸支流,发源于双柏县县城妥甸镇的白竹山,向西北流经南安省级森林公园、西城社区上王家、小村村委会下龙打坝,之后转东北流,经中山村委会田房、格邑村委会、中山村委会大河边、窝碑村委会团结村,之后成为双柏县与楚雄市间的界河,过麦地新村委会草堵后转东南流,经双柏县大庄镇柏子村委会瓦托,于柏子村委会中村东北汇入沙甸河。河长56.3千米,流域面积570.8平方千米。比降11.2‰,落差888米,年均径流量0.86亿立方米。

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