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1893年发现有些霍乱带原者以及伤寒玛莉等案例并无任何症状表现，因此柯霍后来又将第一条原则后半删去。后来在小儿麻痺、疱疹、爱滋病、C型肝炎都有类似发现，甚至今日几乎所有医师和病毒学家都认同小儿麻痺病毒只会对少数感染者造成瘫痪。
第三条原则也同样不尽完美，柯霍本身也在1884年发现霍乱、结核等疾病未必能在不同个体产生相同表现，以今日之观点，爱滋病毒无法感染CCR5 Δ32基因删除的个体。
柯霍氏法则发展于十九世纪，是以当时技术水准能用来辨认病原体的技术通则。但柯霍生活的年代，已有许多疾病明显和某些物质相关，却无法符合这套法则的检验。而过于信任这套研究方法的学界，也在无法透过培养基分离培养病毒的情况下，导致病毒学发展窒碍难行。目前，已有不少疾病证实为某种病原体造成，却不能满足柯霍提出的理论。因此，虽然柯霍氏法则在史上占有一席之地，也持续对微生物诊断有所帮助，但目前研究已无要求必须完全符合四项准则考验。
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烈魄化碧贞节碑是中国山东青岛市郊的农民为了纪念、表彰在一战中死于日军战争罪行的烈妇袁氏而立的石碑，立于1915年，现藏于青岛市博物馆。
阎家山村（现属青岛市市北区，紧邻李沧区）居民袁氏为即墨县河西村袁相潇之女、阎家山村张承炳（碑文错写为张承柄）之妻。第一次世界大战期间，日本对德国宣战，并发动青岛战役，围攻当时在德国殖民统治下的青岛。日军向市郊阎家山村进犯时，袁氏已怀有七、八个月身孕，逃到村北2公里的瓮窑头村（今李沧区晓翁村一带）亲戚家避难，遭遇日军，被日军士兵杀害，时年24岁，腹中男婴同时遇难。有资料称其夫张承炳事后痛不欲生而自缢。
次年农历十月，袁、张两家亲族筹款为袁氏在阎家山村东南立碑，以旌表其贞烈，清末举人张绍价撰写碑文。1982年6月，阎家山村一村民因建造新房需要拉直钢筋，将钢筋一端捆在烈魄化碧碑上，以拖拉机牵引拉直，不慎将该碑断为三截。同年8月，青岛市博物馆将该碑运至大学路馆址，修复后置于院内展出。2002年青岛市博物馆迁至崂山区新馆后，该碑迁至新馆院内展览。
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