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由于逆转录病毒的高突变率，特别是由于突变敏感区域（尤其是包含催化三联体序列的区域），并且考虑到 HIV蛋白酶中一些氨基酸的变化可以使其对抑制剂的明显性大大降低，因此在复制抑制药物的选择压力下，这种酶的位点会迅速改变。
两种类型的突变通常与增加的耐药性有关：“主要”突变和“次要”突变。主要突变涉及HIV-1蛋白酶活性位点的突变，阻止选择性抑制剂与其结合。次要突变是指由于长期暴露于类似化学物质从而导致酶外围的分子变化，可能影响HIV-1蛋白酶的抑制剂特异性。
将HIV耐药性的发展降至最低的一种方法是同时使用一种药物组合，这些药物可以同时抑制HIV复制周期的几个关键方面，而不是一次使用一种药物。其他药物治疗靶点包括逆转录酶、病毒附着、膜融合、cDNA整合和病毒粒子组装。
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